Estudo da diferenciação semelhante à lactacional no carcinoma secretório com origem em glândula salivar / Lactational-like differentiation in secretory carcinoma of salivary gland origin

O carcinoma secretório em glândula salivar é uma neoplasia recentemente descrita que tem os mesmos aspectos morfológicos, imuno-histoquímicos e genéticos do carcinoma secretório de origem mamária. O carcinoma secretório tem características celulares reminiscentes de uma célula secretora lactacional, isto é, um citoplasma vacuolado repleto de gotas lipídicas e um material secretado, por vezes de forma apócrina, que pode lembrar o leite. Mais recentemente, algum nível de diferenciação lactacional foi sugerida no carcinoma secretório de origem salivar. O objetivo do estudo foi verificar se existe uma diferenciação do tipo lactacional em carcinomas secretórios de origem salivar, comparando a outros tipos de carcinomas salivares mais comuns. Foram realizadas reações imuno-histoquímicas para as seguintes proteínas: receptores hormonais (receptor de prolactina e receptor do hormônio do crescimento), proteínas associadas ao produto de secreção da glândula mamária lactacional (mucina-1 (MUC-1), MUC4, globulina de gordura 1 do leite humano, lactoferrina) e proteínas associadas à via Akt-mTOR (PTEN, p-Akt, p-mTOR, p4EBP1, eIF4E, pS6). A maioria dos casos de carcinoma secretório foi negativa para receptor de prolactina e de hormônio do crescimento. Lactoferrina foi positiva em todos os grupos tumorais, porém somente em carcinoma secretório observou-se um padrão de marcação intensa, difuso tanto em célula como em secreção. Todos os casos de carcinoma secretório foram positivos para globulina de gordura do tipo 1, porém o mesmo padrão de marcação foi observado em outros tumores. A maioria dos casos de carcinoma secretório foram positivos para MUC1 e MUC4. Nenhum caso de carcinoma secretório foi positivo para Akt, mas PTEN foi difusamente expresso em 57,1% dos casos. mTOR foi expresso em mais da metade dos casos de carcinoma secretório e dos outros tumores salivares. Entre as proteínas à jusante de mTOR, somente eIF4E demonstrou alta expressão no grupo de estudo. A expressão de marcadores lactacionais não é exclusiva do carcinoma secretório, porém a expressão de lactoferrina é distinta neste grupo de tumores quando comparado aos demais tumores salivares estudados.

Estudo da diferenciação semelhante à lactacional no carcinoma secretório com origem em glândula salivar / Lactational-like differentiation in secretory carcinoma of salivary gland origin

O carcinoma secretório em glândula salivar é uma neoplasia recentemente descrita que tem os mesmos aspectos morfológicos, imuno-histoquímicos e genéticos do carcinoma secretório de origem mamária. O carcinoma secretório tem características celulares reminiscentes de uma célula secretora lactacional, isto é, um citoplasma vacuolado repleto de gotas lipídicas e um material secretado, por vezes de forma apócrina, que pode lembrar o leite. Mais recentemente, algum nível de diferenciação lactacional foi sugerida no carcinoma secretório de origem salivar. O objetivo do estudo foi verificar se existe uma diferenciação do tipo lactacional em carcinomas secretórios de origem salivar, comparando a outros tipos de carcinomas salivares mais comuns. Foram realizadas reações imuno-histoquímicas para as seguintes proteínas: receptores hormonais (receptor de prolactina e receptor do hormônio do crescimento), proteínas associadas ao produto de secreção da glândula mamária lactacional (mucina-1 (MUC-1), MUC4, globulina de gordura 1 do leite humano, lactoferrina) e proteínas associadas à via Akt-mTOR (PTEN, p-Akt, p-mTOR, p4EBP1, eIF4E, pS6). A maioria dos casos de carcinoma secretório foi negativa para receptor de prolactina e de hormônio do crescimento. Lactoferrina foi positiva em todos os grupos tumorais, porém somente em carcinoma secretório observou-se um padrão de marcação intensa, difuso tanto em célula como em secreção. Todos os casos de carcinoma secretório foram positivos para globulina de gordura do tipo 1, porém o mesmo padrão de marcação foi observado em outros tumores. A maioria dos casos de carcinoma secretório foram positivos para MUC1 e MUC4. Nenhum caso de carcinoma secretório foi positivo para Akt, mas PTEN foi difusamente expresso em 57,1% dos casos. mTOR foi expresso em mais da metade dos casos de carcinoma secretório e dos outros tumores salivares. Entre as proteínas à jusante de mTOR, somente eIF4E demonstrou alta expressão no grupo de estudo. A expressão de marcadores lactacionais não é exclusiva do carcinoma secretório, porém a expressão de lactoferrina é distinta neste grupo de tumores quando comparado aos demais tumores salivares estudados.

Salivary flow and salivary proteins in male and female children with autism spectrum disorder: pilot study / Fluxo salivar e proteínas salivares em crianças dos gêneros masculino e feminino com transtorno do espectro do autismo: estudo piloto

Introduction: autism spectrum disorder is a neurodevelopmental condition that affects the establishment of bonds and communication. Dental care is more difficult for people with this disorder, because in addition to communication difficulties, non-cooperation with respect to oral hygiene and continuous use of medication are common. Greater predisposition to caries, as well as alterations in the flow and concentration of salivary proteins were reported in these individuals. Objective: considering that sex can affect salivary flow and protein concentration, our objective was to analyze these parameters in the saliva of children with autism. Material and method: total unstimulated saliva was obtained from 12 boys and 12 girls aged between 5 and 15 years, with the aid of a catheter, after 2 hours of fasting and oral hygiene. Salivary flow was determined by estimating the mass of saliva. Total protein was determined in the supernatant obtained after centrifugation at 10,000 x g, for 10 minutes, by the Lowry method, with bovine albumin as standard. The results are expressed as mean and standard deviation. The data were submitted to the Shapiro-Wilk and Mann Whitney tests, with a significance level of 5%. Result: salivary flow values for boys (0.3555 ± 0.24 ml/min) and girls (0.2522 ± 0.1727 ml/min), and protein values for boys (1.430 ± 0.7480 mg/mL) and girls (1.075 ± 0.3702 mg/mL) were not significantly different between sexes. Conclusion: in children with autism spectrum disorder, sex does not influence unstimulated flow and salivary protein values.

Introdução: o transtorno do espectro autista é uma condição do neurodesenvolvimento que afeta o estabelecimento de vínculos e a comunicação. Cuidados odontológicos são mais difíceis em portadores desse transtorno, pois além da dificuldade de comunicação são comuns a não cooperação na higiene bucal e uso contínuo de medicamentos. Maior predisposição à cárie, alterações no fluxo e na concentração de proteínas salivares foram relatadas nesses indivíduos. Objetivo: considerando que o gênero pode afetar fluxo salivar e concentração proteica, nosso objetivo foi analisar esses parâmetros na saliva de crianças com autismo. Material e método: saliva total não estimulada foi obtida de 12 meninos e 12 meninas com idades entre 5 e 15 anos, com auxílio de um cateter, após 2 horas de jejum e higienização da cavidade bucal. O fluxo salivar foi determinado estimando-se a massa de saliva e o total de proteínas foi determinado no sobrenadante obtido após centrifugação a 10.000 x g, por 10 minutos, pelo método de Lowry, com albumina bovina como padrão. Os resultados foram expressos como média e desvio padrão, sendo submetidos aos testes de Shapiro-Wilk e Mann Whitney, com nível de significância em 5%. Resultado: os valores de fluxo salivar não foram significativamente diferentes quando comparados meninos (0.3555 ± 0.24 ml/min) e meninas (0.2522 ± 0.1727 mL/min), bem como os valores de proteínas (meninos: 1.430 ± 0.7480 mg/mL; meninas 1,075 ± 0,3702 mg/mL). Conclusão: em crianças com transtorno do espectro autista o gênero não influencia os valores de fluxo não estimulado e proteínas salivares.

Effect of antihistamine-containing syrup on salivary metabolites: an in vitro and in vivo study

Abstract This study tested the null hypothesis that antihistamine-containing syrup does not change salivary metabolites in vitro and in vivo. For the in vitro experiments, saliva from 10 volunteers was mixed with a syrup or pill suspension of loratadine (1 mg/ml Claritin®, Schering-Plough, Rio de Janeiro, Brazil). For the in vivo experiment, 10 volunteers performed a mouth rinse with 10 mL of antihistamine syrup (Claritin®; Schering-Plough, Rio de Janeiro, Brazil) for 20 seconds and then discarded the rinse water. After 20 seconds, 5 mL of unstimulated whole saliva was spit into a plastic tube kept on ice. The protein profile of in vitro and in vivo experiments was analyzed using 12% sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis. The samples were also analyzed by nuclear magnetic resonance (NMR) spectroscopy, followed by Principal Component Analysis and Wilcoxon test (p < 0.05). There were differences in salivary metabolites after syrup interaction. The salivary concentrations of acetate, n-caproate, arginine, glutamate, and lysine among other metabolites were reduced with the syrup in both in vivo and in vitro experiments (p < 0.05), but no differences were observed when the pill suspension was used (p > 0.05). Similar changes in metabolite profiles were observed in both in vitro and in vivo experiments. Electrophoresis revealed no difference in the salivary protein pattern. The null hypothesis was rejected because the intake of syrup medicine changes the salivary composition and influences oral homeostasis and susceptibility to oral diseases.

Mucina y Enfermedad Periodontal / Mucin and periodontal disease

La enfermedad periodontal (EP) es una patología que afecta principalmente los tejidos que rodean a la pieza dentaria (PD) y se caracteriza, en la mayoría de los casos, por una exposición bacteriana que favorece una respuesta destructiva e inflamatoria del huésped, que conduce a la pérdida de inserción periodontal de la PD, provocando una marcada reabsorción ósea y la posible pérdida de las PD. El diagnóstico de EP implica evaluaciones clínicas y radiográficas, en la actualidad se están realizando diversas investigaciones para evaluar posibles compuestos en los fluidos orales a través de lo cual puede ser posible evaluar la presencia y gravedad de estas enfermedades, como así también el riesgo en los pacientes. Hay evidencias de la interacción de macromoléculas salivales, como las mucinas, con microorganismos específicos. De esta manera las mucinas, junto con otros productos de la saliva, ayudan a modular tanto el número como el tipo de proliferación de ciertos organismos y provocar la disminución de otros. La revisión de la literatura actual concluye que las mucinas salivales pueden servir como un parámetro bioquímico de la inflamación del periodonto (AU)

Periodontal disease (PD) is a pathology that mainly affects the tissues surrounding the tooth (PD) and is characterized, in most cases, by a bacterial exposure that favors a destructive and inflammatory response of the host, which leads to the loss of periodontal insertion of the PD, causing a marked bone resorption and the possible loss of the PD. The diagnosis of PD involves clinical and radiographic evaluations, at present several investigations are being carried out to evaluate possible compounds in oral fluids through which it may be possible to evaluate the presence and severity of these diseases, as well as the risk in patients. There is evidence of the interaction of salivary macromolecules, such as mucins, with specific microorganisms. In this way, mucins, together with other saliva products, help modulate both the number and type of proliferation of certain organisms and cause the decrease of others. The review of the current literature concludes that salivary mucins can serve as a biochemical parameter of inflammation of the periodontium (AU)

Biomarcadores salivares do estresse oxidativo em crianças com cárie dentária: revisão sistemática e meta-análises / Salivary biomarkers of oxidative stress in children with dental caries: systematic review and meta-analysis

Objetivo. Avaliar a relação entre biomarcadores salivares de estresse oxidativo e cárie dentária em crianças. Métodos. Estudos realizados em crianças de até 12 anos comparando biomarcadores salivares de estresse oxidativo como malondialdeído (MDA), superóxido dismutase (SOD), ácido úrico, capacidade antioxidante total (TAC) e proteína total, considerando crianças com lesões de cárie dentária e sem cárie foram selecionados. Além disso, parâmetros salivares como fluxo salivar, pH, capacidade tampão e níveis de cálcio foram avaliados. Uma revisão sistemática da literatura foi realizada em 8 bases de dados. A diferença média padronizada (SMD) foi medida usando variância inversa como método estatístico e efeitos aleatórios como modelo de análise, correspondendo a um intervalo de confiança (IC) de 95%. Resultados. Os níveis de TAC foram maiores em crianças afetadas por cárie dentária em comparação com as sem cárie (grupo controle), independentemente da idade (SMD 2,66; IC 1,33; 3,98) ou sexo (SMD 0,98; IC 0,56; 1,39). Quando ajustados para proteína normalizada, os níveis de MDA foram menores no grupo de cárie dentária do que no grupo controle (SMD -16,5; IC - 29,02; -4,00), e os níveis de SOD foram maiores no grupo de cárie dentária (SMD 5,09; IC 0,01; 10,18). A concentração de proteína total na saliva de crianças com cárie dentária foi maior do que no grupo controle, independentemente da idade (SMD 0,98; IC 0,27; 1,69) ou sexo (SMD 0,77; IC 0,45; 1,10). Os parâmetros salivares avaliados apresentaram níveis mais baixos em crianças com cárie dentária (p< 0,05). Conclusões. Os níveis de biomarcadores de estresse oxidativo e parâmetros salivares estão alterados na saliva de crianças com cárie dentária(AU)

Objective. To assess the relationship between salivary biomarkers of oxidative stress and dental caries in children. Methods. Studies conducted in children up to 12 years old comparing salivary biomarkers of oxidative stress such as malondialdehyde (MDA), superoxide dismutase (SOD), uric acid, total antioxidant capacity (TAC), and total protein, considering children with dental caries lesions and caries-free ones were selected. In addition, salivary parameters such as salivary flow, pH, buffering capacity, and calcium levels were evaluated. A systematic literature review was carried out in 8 databases. The standardized mean difference (SMD) was measured using inverse variance as a statistical method and random effects as an analysis model, corresponding to a 95% confidence interval (CI). Results. The TAC levels were higher in children affected by dental caries compared to caries-free ones (control group), regardless of age (SMD 2.66; CI 1.33; 3.98), or gender (SMD 0.98; CI 0.56; 1.39). When adjusted for normalized protein, MDA levels were lower in the dental caries group than in the control group (SMD -16.51; CI -29.02; -4.00), and SOD levels were higher in the dental caries group (SMD 5.09; CI 0.01; 10.18). The total protein concentration in saliva of children with dental caries was higher than in the control group, regardless of age (SMD 0.98; CI 0.27; 1.69), or gender (SMD 0.77; CI 0.45; 1.10). The salivary parameters assessed had lower levels in children affected by dental caries (p<0.05). Conclusions. The levels of oxidative stress biomarkers and salivary parameters are altered in saliva of children with dental caries(AU)

Estimation of salivary ferritin in children with childhood caries ­ a cross sectional study / Estimativa da ferritina salivar em crianças com cárie na infância - um estudo transversal

Objective: Early childhood caries is the presence of dental caries in a child upto seventy one months of age. Saliva plays a major role in maintaining good oral health. The composition of saliva acts as a marker for oral health and the salivary proteins help in modulating the oral microflora in the oral cavity. Some salivary biomarkers help in detecting caries risk and can also predict their prognosis. Ferritin is one of the major biomarkers present in the saliva which acts as an iron binding protein and also as a monitoring tool in children suffering from iron deficiency. The ferritin levels are in increased in serum as well as in saliva to balance the deficiency of iron in the body. Material and methods: Sixty children were selected for the study aged between three to six years. The saliva sample was collected using standard spit method in a sterile container and Ferritin was tested in the samples by Chemiluminescence microparticle immunoassay(CMIA). Results: Salivary ferritin was found to be higher in the saliva of children with early childhood caries(mean value= 5.867) than in children without early childhood caries(mean value= 3.412). Conclusion: A direct association is present between salivary ferritin levels and dental caries. Increased level of ferritin is observed in children with Early childhood caries. Clinical relevance: The level of salivary ferritin is found to be raised in the present study in children with Early childhood caries. The exact mechanism is although not known it can be assumed that the children with early childhood caries might have deficiency of iron which has led to the increased amount of salivary ferritin in the saliva. (AU)

Objetivo: A cárie precoce é definida como a presença de cárie dentária em uma criança de até setenta e um meses de idade. A saliva desempenha um papel importante na manutenção de uma boa saúde bucal. A composição da saliva atua como um marcador para a saúde bucal e as proteínas salivares auxiliam na modulação da microflora oral na cavidade oral. Alguns biomarcadores salivares ajudam a detectar o risco de cárie e também podem prever seu prognóstico. A ferritina é um dos principais biomarcadores presentes na saliva, que atua como uma proteína ligadora de ferro e também como uma ferramenta de monitoramento em crianças com deficiência de ferro. Os níveis de ferritina aumentam tanto no soro quanto na saliva para equilibrar a deficiência de ferro no corpo. Material e Métodos: foram selecionadas para o estudo 60 crianças com idades entre três e seis anos. A amostra de saliva foi coletada pelo método padrão de cuspir em um recipiente estéril e a ferritina foi testada nas amostras através de um imunoensaio de micropartículas por quimioluminescência (CMIA). Resultados: A ferritina salivar foi maior na saliva de crianças com cárie na primeira infância (valor médio = 5,867) do que em crianças sem cárie na primeira infância (valor médio = 3,412). Conclusão: Existe uma associação direta entre os níveis de ferritina salivar e a cárie dentária. Nível elevado de ferritina é observado em crianças com cárie na primeira infância. Relevância clínica: O nível de ferritina salivar está elevado no presente estudo em crianças com cárie na primeira infância. Embora o mecanismo exato seja desconhecido, pode-se presumir que crianças com cárie na primeira infância podem ter deficiência de ferro, o que levou a um aumento na quantidade de ferritina salivar na saliva. (AU)

Evaluation of salivary protein patterns among a rural population exposed and non-exposed to arsenic-contaminated drinking water in areas of Tucumán (Argentina): a pilot study

Abstract Arsenic contamination in the environment and groundwater is a major global public health problem. Several researchers suggest that the toxicity of arsenic could be related to oral cancer development, usually resulting from potentially malignant lesions. During pathological processes, salivary proteins suffer modifications, which could lead to the discovery of new biomarkers. Objective To analyze the protein profile in human saliva samples from a rural population exposed to high levels of arsenic in drinking water and its association with potentially malignant lesions. Methodology This observational, analytic and cross-sectional design included 121 patients from the state of Graneros (Tucumán, Argentina). Arsenic concentration in drinking water was determined and, according to the values obtained, individuals were divided into 2 groups: exposed group and non-exposed group. Saliva samples were obtained, and total protein concentration was measured by Bradford method. Finally, Laemmli SDS-polyacrylamide gel electrophoresis was conducted to obtain the protein profile. Results Total protein concentration in saliva was lower in the exposed group than in the non-exposed group. Average areas of 20 and 42 KDa bands were significantly lower in exposed group than non-exposed group. Conclusion Chronic intake of high arsenic concentrations in drinking water produces changes in the salivary protein profile, which is associated with the presence of potentially malignant lesions.

Concentración de mucina salival en pacientes con enfermedad periodontal / Concentração de mucina salivar em pacientes com doença periodontal / Salivary mucin concentration in patients with periodontal disease

Resumen El objetivo de este trabajo fue estudiar la relación entre la concentración de mucina salival y la enfermedad periodontal. La muestra se dividió en tres grupos de 20 individuos cada uno: Grupo 1 sin enfermedad periodontal; Grupo 2 con gingivitis; y Grupo 3 con periodontitis. En todas las muestras salivales se confirmó la presencia de mucina, el Grupo 1 presentó un valor promedio de 1,27 mg/ml. En el Grupo 2 se registró un promedio de 1,93 mg/ml. En el Grupo 3 se observó un promedio de 3,01 mg/ml. El Análisis de la Variancia y posterior prueba de F (F = 25,01, p < 0,0001) confirman diferencias significativas en los contenidos de mucina entre grupos. El aumento de la concentración de mucina salival en pacientes periodontales podría representar un marcador químico de utilidad como coadyuvante en el diagnóstico clínico de esta enfermedad.

Resumo O objetivo deste trabalho foi estudar a relação entre a concentração de mucina salivar e a doença periodontal. A amostra foi dividida em três grupos de 20 indivíduos cada: Grupo 1 sem doença periodontal; Grupo 2 com gengivite; e Grupo 3 com periodontite. Em todas as amostras salivares foi confirmada a presença de mucina, o Grupo 1 apresentou valor médio de 1,27 mg / ml. No Grupo 2, foi registrada uma média de 1,93 mg / ml. No Grupo 3 foi observada uma média de 3,01 mg / ml. A Análise de Variância e o teste F subsequente (F = 25,01, p <0,0001) confirmam diferenças significativas nos conteúdos de mucina entre os grupos. O aumento da concentração de mucina salivar em pacientes periodontais pode representar um marcador químico útil como adjuvante no diagnóstico clínico desta doença.

Abstract This work aimed to study the relationship between salivary mucin concentration and periodontal disease. The sample was divided into three groups of 20 individuals each: Group 1 with no periodontal disease, Group 2 with gingivitis, and Group 3 with periodontitis. Mucin was detected in all the saliva samples. Group 1 had an average value of 1.27 mg/ml. Group 2 had an average value of 1.93 mg/ml. Group 3 had an average value of 3.01 mg/ml. The analysis of variance and subsequent F test (F = 25.01, p < 0.0001) confirmed significant differences in mucin content between the groups. Increased salivary mucin concentration in periodontal patients could be a useful chemical marker for the clinical diagnosis of periodontal disease.

Revisión de la literatura: composición salival y su relación con caries dental en embarazadas / Review of the literature: salivary composition and its relationship with dental caries in pregnant women

La saliva es un fluido complejo muy importante en las funciones de la cavidad bucal. El embarazo es un estado normal en el que el embrión se forma y evoluciona durante nueve meses. En este proceso la mujer sufre una serie de cambios fisiológicos y psicológicos. Entre ellos, tiene modificaciones en la saliva y, por consiguiente, en el flujo, pH y concentración de proteínas salivales, que desempeñan un papel importante en la protección contra la infección en los seres humanos. Su nivel en la cavidad oral está sujeto a constantes fluctuaciones que dependen de numerosos factores. El embarazo genera adaptaciones en la fisiología femenina que pueden repercutir en la salud bucal de la gestante. Las afecciones bucales más frecuentes son la caries dental y la gingivitis. Si estas afecciones no son tratadas a tiempo, pueden repercutir en la salud del futuro bebé. Se realizó una revisión bibliográfica con el objetivo de conocer acerca de los componentes de la saliva y su relación con caries dental en las embarazadas, considerando los tres trimestres de gestación (AU)

Saliva is a complex fluid very important in the functions of the oral cavity. Pregnancy is a normal state in which the embryo forms and evolves for nine months. In this process, women undergo a series of physiological and psychological changes. Among them, it has modifications in saliva and, consequently, in the flow, pH and concentration of salivary proteins, which play an important role in protecting against infection in humans. Its level in the oral cavity is subject to constant fluctuations that depend on numerous factors. Pregnancy generates adaptations in female physiology that can affect the oral health of the pregnant woman. The most common oral conditions are dental caries and gingivitis. If these conditions are not treated in time, they can affect the health of the future baby. A bibliographic review was carried out with the objective of knowing about the components of saliva and its relationship with dental caries in pregnant women, considering the three trimesters of gestation (AU)

Los patrones electroforéticos de proteínas salivales permiten diferenciar los grupos transandino y cisandino de las especies de Rhodnius de Colombia / Salivary proteins electrophoretic patterns enabled differentiating Colombian Rhodnius Trans-Andean and Cis-Andean groups

Introducción. Las especies Rhodnius (Hemiptera: Reduviidae: Triatominae) están conformadas por insectos hematófagos vectores de Trypanosoma cruzi, agente etiológico de la enfermedad de Chagas, y T. rangeli, parásito infectivo pero no patógeno para el vertebrado. El estudio de la diversidad proteica de la saliva de estos insectos permite la obtención de perfiles electroforéticos unidimensionales característicos de algunas especies de triatominos. Sin embargo, el reporte de los patrones electroforéticos de proteínas salivales de las especies de Rhodnius ha sido escaso. Objetivo. Hacer un análisis comparativo de los perfiles electroforéticos unidimensionales de las proteínas salivales de R. colombiensis, R. pallescens, R. pictipes, R. prolixus y R. robustus. Materiales y métodos. Se obtuvieron los perfiles electroforéticos de la saliva de las especies en estudio mediante electroforesis en gel de poliacrilamida con dodecilsulfato sódico (Sodium Dodecyl Sulfate Polyacrylamide Gel Electrophoresis, SDS-PAGE) y se construyó un fenograma mediante el método UPGMA (Unweighted Pair Group Method Using Arithmetic Averages). Resultados. Los perfiles electroforéticos de las proteínas solubles de saliva presentaron bandas en un rango de masa aproximado de 15 a 45 kDa, los cuales permitieron diferenciar las cinco especies estudiadas. El fenograma reveló la existencia de dos grupos principales: uno conformado por los grupos cisandinos Pictipes y Prolixus y otro constituido por el grupo transandino Pallescens. Conclusiones. Existen diferencias en los perfiles electroforéticos de las proteínas salivales entre R. colombiensis, R. pallescens, R. pictipes, R. prolixus y R. robustus, cuya variabilidad permitió construir un fenograma congruente con los grupos del género Rhodnius.

Introduction: Rhodnius (Hemiptera: Reduviidae: Triatominae) species are made up of haematophagous insect vectors for Trypanosoma cruzi (Chagas' disease aetiological agent) and T. rangeli, an infective parasite that is not pathogenic for vertebrate hosts. The study of their salivary protein diversity enables the obtention of characteristic one-dimensional electrophoretic profiles of some triatomine species; however, few reports have dealt with Rhodnius species salivary proteins electrophoretic patterns. Objective: To compare R. colombiensis, R. pallescens, R. pictipes, R. prolixus, and R. robustus' salivary proteins one-dimensional electrophoretic profiles. Materials and methods: SDS-PAGE was used for obtaining electrophoretic profiles of saliva from the species under study. The unweighted pair group method with arithmetic mean (UPGMA) was used for constructing a phenogram. Results: Electrophoretic profiles of soluble saliva had protein bands ranging from 15 to 45 kDa, thereby enabling the five species studied to be differentiated. The phenogram revealed two main groups, one formed by the Pictipes and Prolixus cis-Andean groups and another consisting of the Pallescens trans-Andean group. Conclusion: Differences were revealed regarding R. colombiensis, R. pallescens, R. pictipes, R. prolixus, and R. robustus electrophoretic profiles of salivary proteins; their variability facilitated constructing a phenogram which was taxonomically congruent with the groups from the genus Rhodnius.

Optimizing the formation of the acquired enamel pellicle in vitro for proteomic analysis

Abstract Saliva is the major contributor for the protein composition of the acquired enamel pellicle (AEP), a bacteria-free organic layer formed by the selective adsorption of salivary proteins on the surface of the enamel. However, the amount of proteins that can be recovered is even smaller under in vitro condition, due to the absence of continuous salivary flow. Objective This study developed an in vitro AEP protocol for proteomics analysis using a new formation technique with different collection solutions. Methodology 432 bovine enamel specimens were prepared (4x4 mm) and divided into four groups (n=108). Unstimulated saliva was provided by nine subjects. The new AEP formation technique was based on saliva resupply by a new one every 30 min within 120 minutes at 37ºC under agitation. AEP was collected using an electrode filter paper soaked in the collection solutions according with the group: 1) 3% citric acid (CA); 2) 0.5% sodium dodecyl sulfate (SDS); 3) CA followed by SDS (CA+SDS); 4) SDS followed by CA (SDS+CA). The pellicles collected were processed for analysis through LC-ESI-MS/MS technique. Results A total of 55 proteins were identified. The total numbers of proteins identified in each group were 40, 21, 28 and 41 for the groups CA, SDS, CA+SDS and SDS+CA, respectively. Twenty-three typical AEP proteins were identified in all groups, but Mucin was only found in CA and CA+SDS, while three types of PRP were not found in the SDS group. Moreover, a typical enamel protein, Enamelin, was identified in the CA+SDS group only. Conclusion The new technique of the in vitro AEP formation through saliva replacement was essential for a higher number of the proteins identified. In addition, considering practicality, quantity and quality of identified proteins, citric acid seems to be the best solution to be used for collection of AEP proteins.

Efeitos da fibrose cística sobre o microbioma bucal e o proteoma salivar / Effects of cystic fibrosis on oral microbiome and salivary proteome

A Fibrose Cística (FC) é uma doença genética de elevada prevalência global e que causa função anormal das glândulas exócrinas. As alterações nas funções das glândulas salivares podem impactar a saúde bucal que por sua vez podem influenciar a saúde geral. A boca pode representar um reservatório microbiano de potenciais patógenos e colonizadores das vias aéreas, causando infecções crônicas pulmonares. O objetivo deste estudo foi avaliar os impactos da FC na cavidade bucal, saliva e microbioma bucal. Foram incluídos no estudo 50 pacientes com diagnóstico de FC com idades de 3 a 20 anos, divididos em 2 grupos de acordo com o grau de severidade da doença determinado pelo escore de Shwachman-Kulczycki: G1 (baixa severidade) e G2 (alta severidade). Foi também incluído grupo controle pareado ao grupo de estudo quanto ao gênero e idade (G3, n=50). A presença de lesões de cárie foi avaliada. O impacto da FC sobre a saúde bucal foi avaliado por questionário preenchido pelos pais ou responsáveis. Amostra de saliva estimulada foi coletada de todos os pacientes. O microbioma bucal foi avaliado por Human Oral Microbe Identification using Next Generation Sequencing (HOMINGS) e metodologias de cultivo, para análise da microbiota potencialmente oportunista e cariogênica. Realizouse ainda a análise proteômica da saliva e quantificação de imunoglobulinas salivares. Os resultados foram analisados e, de acordo com a distribuição dos dados e avaliação desejada, foram aplicados os testes estatísticos apropriados, sendo adotado o nível de significância de 5%. O questionário aplicado apontou que os pais consideraram que a saúde bucal não impacta negativamente a saúde geral dos seus filhos em todos os grupos estudados Os grupos de pacientes com FC apresentaram menores índices de Ceo-d, CPO-D, taxa de fluxo salivar e pH inicial em relação ao grupo controle. As contagens de estafilococos e leveduras foram significativamente mais elevadas nos grupos FC. Todos os isolados fúngicos foram suscetíveis aos antifúngicos testados. Alta incidência de resistência foi observada dentre as cepas bacterianas. Os níveis de IgA foram mais altos nos grupos com FC em relação ao controle. Pseudomonas aeruginosa foi detectada apenas nos grupos com FC. A análise proteômica identificou 7 potenciais biomarcadores para a fibrose cística. Conclui-se que o monitoramento do microbioma oral de pacientes com fibrose cística pode ser uma ferramenta importante na prevenção da colonização pulmonar por potenciais patógenos. O estudo de biomarcadores salivares pode contribuir para o desenvolvimento de novos métodos de diagnóstico alternativos ao teste do suor para a fibrose cística(AU)

Cystic Fibrosis (CF) is a genetic disease with high global prevalence that causes abnormal function of the exocrine glands. The functional alterations of salivary glands and saliva can impact the oral health and influence general health. Oral cavity may represent a microbial reservoir of potential pathogens that can colonize the airways and cause chronic pulmonary infections. The aim of this study is to evaluate the impact of cystic fibrosis on the oral cavity, saliva and oral microbiome. Fifty CF patients aged from 3 to 20 years were divided into two groups according to the disease severity determined by the Shwachman-Kulczycki score: G1 (low severity) and G2 (high severity). Also, age and gender paired control group was included in the study (G3, n = 50). The occurrence of caries was evaluated. The impact of CF on oral health was evaluated by a questionnaire filled by parents or responsible person. Stimulated whole saliva (WS) samples were collected from all patients. The oral microbiome was analyzed by Human Oral Microbe Identification using Next Generation Sequencing (HOMINGS) and by microbiological culture methodologies to evaluate the potential opportunistic and cariogenic microbiota. The proteomic analysis of saliva and quantification of salivary immunoglobulins were carried out. Statistical analysis was performed according to the normality of the data at a significance level of 5%. The applied questionnaire pointed out that oral health did not impact systemic health negatively, according to the parents in all groups. The groups of patients with CF had lower rates of dmft, DMFT, salivary flow rate and initial pH in comparison to the control group. The counts of staphylococcal and yeast from CF groups were significant higher than the controls. All fungal isolates were susceptible to the antifungal agents. Higher incidence of bacterial resistance was observed. The IgA levels were higher in both CF groups than in the control group. Pseudomonas aeruginosa were detected only in the CF groups. The proteomic analysis identified 7 potential biomarkers for cystic fibrosis. The effects of CF in saliva and oral microbiome must be considered to establishment of therapeutic and preventives multidisciplinary protocols aiming overall health and quality of life of these patients. In conclusion, monitoring the oral microbiome of CF patients may be an important tool in the prevention of pulmonary colonization by potential pathogens. The study of salivary biomarkers may contribute to the development of new diagnostics methods alternative to sweat test for CF(AU)

Diagnostic potential of saliva proteome analysis: a review and guide to clinical practice

Abstract: Proteomic techniques have become popular in medicine and dentistry because of their widespread use in analyzing bodily fluids such as blood, saliva, urine, and gingival crevicular fluids as well as hard tissues such as enamel, dentine, and cementum. This review is a guide to proteomic techniques in general dentistry, summarizing techniques and their clinical application in understanding and diagnosing diseases and their use in identifying biomarkers of various diseases.

Concentrações de cortisol salivar de idosos institucionalizados e não institucionalizados / Concentraciones de cortisol salival de ancianos institucionalizados y no institucionalizados / Salivary cortisol concentrations in institutionalized and non-institutionalized elderly people

Introdução: devido às limitações inerentes do processo de envelhecimento, a institucionalização é uma realidade, podendo gerar impacto na saúde física e psicológica do individuo sênior. Objetivo: determinar as concentrações de cortisol salivar de idosos institucionalizados e não institucionalizados e verificar as condições de saúde bucal e dependência física. Métodos: estudo transversal, descritivo e analítico, com amostra composta por 80 indivíduos, sendo 45 institucionalizados e 35 não institucionalizados. Realizou-se exame clínico bucal para avaliação de uso e necessidade de prótese dentária nos arcos superior e inferior. Também foi realizada coleta salivar, para análise da concentração de cortisol, marcador biológico do nível de estresse. Resultados: a maioria dos idosos apresentou-se desdentado total, sendo 84,44 porcento no grupo institucionalizado e 71,43 porcento no grupo não institucionalizado. Os idosos institucionalizados apresentaram menor índice de uso de próteses, quando comparados ao grupo de idosos não institucionalizados (p= 0,0013). A análise das concentrações de cortisol salivar demonstrou diferenças significantes entre os grupos, com taxas mais elevadas no grupo institucionalizado (p= 0,0397). Maiores concentrações de cortisol salivar foram encontradas em indivíduos que possuíam necessidades protéticas, com diferença estatisticamente significante (p= 0,0454). Conclusão: os idosos institucionalizados apresentaram elevadas concentrações de cortisol salivar, maior necessidade de uso de próteses e apresentaram-se mais dependentes, quando comparados com o grupo não institucionalizado(AU)

Introducción: debido a las limitaciones inherentes del proceso de envejecimiento, la institucionalización es una realidad, lo que puede generar impacto en la salud física y psicológica del adulto mayor. Objetivo: determinar las concentraciones de cortisol salival de ancianos institucionalizados y no institucionalizados, y verificar variables como salud bucal y dependencia física. Métodos: estudio transversal, descriptivo y analítico, en el cual la muestra estuvo compuesta por 80 individuos, de estos 45 eran institucionalizados y 35 no institucionalizados. Se realizó examen clínico bucal para evaluar el uso y necesidad de prótesis en los arcos superior e inferior. También se realizó recolecta salivar, para análisis de la concentración de cortisol, marcador biológico del nivel de estrés. Resultados: la mayoría de los ancianos se presentaron desdentados totales, para el 84,44 por ciento en el grupo institucionalizado y 71,43 por ciento en el grupo no institucionalizado. Los ancianos institucionalizados presentaron menor índice de uso de prótesis, en comparación con el grupo de ancianos no institucionalizados (p= 0,0013). El análisis de las concentraciones de cortisol salival demostró diferencias significativas entre los grupos, con tasas más elevadas en el grupo institucionalizado (p= 0,0397). Mayores concentraciones de cortisol salivar fueron encontradas en individuos que poseían necesidades protésicas, con diferencia estadísticamente significante (p= 0,0454). Conclusiones: ancianos institucionalizados presentan elevadas concentraciones de cortisol salival, mayor necesidad de uso de prótesis y se presentan más dependientes, al ser comparados con el grupo no institucionalizado(AU)

Introduction: due to the limitations inherent to the process of aging, institutionalization is a reality which may have an impact on the physical and psychological health status of elderly people. Objectives: determine salivary cortisol concentrations in institutionalized and non-institutionalized elderly people, and verify variables such as oral health and physical dependence. Methods: a descriptive analytical cross-sectional study was conducted of a sample of 80 individuals, of whom 45 were institutionalized and 35 non-institutionalized. Oral clinical examination was performed to evaluate the use of and need for dental prostheses in the upper and lower arches. Saliva was collected to determine the concentration of cortisol, a biological marker of stress levels. Results: most of the sample were totally edentulous elderly people: 84.44 percent in the institutionalized group and 71.43 percent in the non-institutionalized group. A lower rate of prosthesis use was found in the institutionalized sample than in the non-institutionalized sample (p= 0.0013). Analysis of salivary cortisol concentrations revealed significant differences between the groups, with higher values in the institutionalized group (p= 0.0397). Higher salivary cortisol concentrations were found among individuals with prosthetic needs, the difference being statistically significant (p= 0.0454). Conclusions: institutionalized elderly people had higher salivary cortisol concentrations, greater prosthetic needs, and were more care dependent than the non-institutionalized group(AU)

Identification of the Salivary Microbiota of Patients with Oral Cancer in Antofagasta- Chile by Molecular Diagnosis of the 16S rRNA Gene / Identificación de la Microbiota de Saliva de Pacientes con Cáncer Oral de Antofagasta por Diagnóstico Molecular del Gen ARNr 16S

ABSTRACT: Oral cancer, is part of several cancers that affect head and neck, and that according to numerous studies shows an increase of approximately 3-5 % of all cancers. In the last 10 years there has been an increased interest in saliva for its use as a diagnostic tool, due to its easy access, and non-invasive sample collection, unlike blood samples. Studies of metagenomics to the microbiota of oral cancer patients have shown the presence of some groups in greater proportion, it is postulated that they could be used as markers especially in the saliva of these patients. In Antofagasta the number of patients with this type of cancer increases each year. However, there are no studies on the changes that affect the oral microbiota in these patients. The objective of this study is to contribute to the knowledge of the microbiota present in the saliva of patients with oral cancer in the region of Antofagasta, limiting this study exclusively to the group of cultivable anaerobic bacteria. The strains identified are related to the group of Streptococcus mitis / oralis, S. anginosus and S. gordoni, only one strain is grouped near the cluster that includes S. australis and S. parasanguinis. 36.4 % of the molecularly identified isolates, are closely related to the S. anginosus species described in the literature in oropharyngeal tumors. The same percentage is obtained for the taxa related to the cluster that includes S. mitis, proposed in other studies as a diagnostic indicator in subjects with oral squamous cell carcinoma.

RESUMEN: El de cáncer oral, es parte de un grupo de cáncer que afecta cabeza y cuello, y que según demuestran numerosos estudios va en aumento corresponde aproximadamente al 3-5 % de todos los cánceres. En los últimos 10 años la saliva ha aumentado su interés para su uso como diagnóstico debido a su fácil acceso y recolección no invasiva, a diferencia la sangre. Estudios de metagenómica a la microbiota de pacientes con cáncer bucal han demostrado la presencia de algunos grupos en mayor proporción, se postula que podrían ser utilizados como marcadores especialmente en la saliva de estos pacientes. En Antofagasta el número de pacientes con este tipo de cáncer aumenta cada año, sin embargo no hay estudios sobre los cambios que afectan a la microbiota bucal de estos pacientes. El objetivo de este estudio es contribuir al conocimiento de la microbiota presente en la saliva de los pacientes con cáncer bucal en la región de Antofagasta acotando este estudio exclusivamente al grupo de bacterias anaerobias cultivables. Las cepas identificadas se relacionan con el grupo de Streptococcus mitis/oralis, S. anginosus y S. gordoni, sólo una cepa se agrupa cerca del cluster que incluye a S. australis y S. parasanguinis. Un 36,4 % de los aislados identificados molecularmente se relacionan cercanamente a la especie S. anginosus descrita en la bibliografía en tumores orofaríngeos y el mismo porcentaje se obtiene para los taxones relacionados al cluster que agrupa a S. mitis, propuesto en otros estudios como indicador diagnóstico en sujetos con carcinoma oral de células escamosas.

Standardization of a protocol for shotgun proteomic analysis of saliva

Abstract Saliva contains numerous proteins and peptides, each of them carries a number of biological functions that are very important in maintaining the oral cavity health and also yields information about both local and systemic diseases. Currently, proteomic analysis is the basis for large-scale identification of these proteins and discovery of new biomarkers for distinct diseases. Objective This study compared methodologies to extract salivary proteins for proteomic analysis. Material and Methods Saliva samples were collected from 10 healthy volunteers. In the first test, the necessity for using an albumin and IgG depletion column was evaluated, employing pooled samples from the 10 volunteers. In the second test, the analysis of the pooled samples was compared with individual analysis of one sample. Salivary proteins were extracted and processed for analysis by LC-ESI-MS/MS. Results In the first test, we identified only 35 proteins using the albumin and IgG depletion column, while we identified 248 proteins without using the column. In the second test, the pooled sample identified 212 proteins, such as carbonic anhydrase 6, cystatin isoforms, histatins 1 and 3, lysozyme C, mucin 7, protein S100A8 and S100A9, and statherin, while individual analysis identified 239 proteins, among which are carbonic anhydrase 6, cystatin isoforms, histatin 1 and 3, lactotransferrin, lyzozyme C, mucin 7, protein S100A8 and S100A9, serotransferrin, and statherin. Conclusions The standardization of protocol for salivary proteomic analysis was satisfactory, since the identification detected typical salivary proteins, among others. The results indicate that using the column for depletion of albumin and IgG is not necessary and that performing individual analysis of saliva samples is possible.

O papel da concentração salivar e sérica da proteína SLPI (inibidor de protease secretada por leucócitos) na progressão do carcinoma epidermoide da cavidade bucal / The Role of Tumor Expression and Salivary and Serum Concentration of Protein SLPI (Protein Inhibitor Secreted by Leukocytes) in Progression of Squamous Cell Carcinoma of the Oral Cavity

Introdução: A avaliação dos processos inflamatórios em pacientes com tumores de boca é assunto atual na literatura científica. Poucos estudos, entretanto avaliaram a expressão da Proteína Inibidora de Protease Secretada por Leucócito (SLPI), marcador específico de inflamação, em pacientes com câncer de boca Objetivos: 1.Descrever a frequência da concentração de SLPI salivar e sérica em pacientes com câncer bucal. 2. Avaliar a associação dessas concentrações com características clínicas, sociodemográficas e de estilo de vida. Metodologia: Realizou-se a quantificação de SLPI em soro por meio do teste ELISA em pacientes com carcinoma epidermoide da cavidade bucal atendidos no Hospital Heliópolis da Secretaria de Estado da Saúde do Estado de São Paulo no período entre 2011 e 2017. Dados relativos a estadiamento do tumor, características sócio demográficas dos pacientes, hábitos alimentares e estilo de vida foram coletados por meio de prontuários médicos e questionários aplicados aos pacientes. Foram realizados teste de correlação de Spearman e teste qui-quadrado para testar possíveis associações. Resultados: Foram encontradas: correlação positiva entre SLPI em saliva maços-ano de tabagismo (p=0,03) e correlação negativa entre SLPI bochecho para frequência no consumo de carne vermelha (p=0,01). A quantificação de SLPI em soro por quartis apresentou associação com significância estatística para escolaridade (maior proporção de pessoas com ensino médio completo no quartil mais baixo de SLPI), frequência de escovação dentária (maior proporção de pessoas que escovam os dentes mais do que uma vez por dia no quartil com maior SLPI) e estadiamento patológico (2º quartil com maior proporção de estadiamentos 3 e 4). Na avaliação de SLPI em saliva e bochecho, houve associação com o consumo de carne vermelha, havendo indivíduos com consumo mais baixo apenas nos quartis mais superiores de SLPI Conclusão: Este estudo concorda com a hipótese de que o SLPI em pacientes com câncer de boca se relaciona com estilo de vida e estadiamento da lesão

Introduction: The evaluation of inflammatory processes in patients with oral tumors is a current topic in the scientific literature. Few studies, however, have evaluated the expression of the Leukocyte Secreted Protein Inhibitor Protein (SLPI), a specific marker of inflammation in patients with oral cancer. Objectives: 1. To describe the frequency of salivary and serum SLPI in patients with oral cancer. 2. To evaluate the association of these concentrations with clinical, sociodemographic and lifestyle characteristics. Methodology: Serum SLPI was quantified by ELISA in patients with squamous cell carcinoma of the oral cavity treated at the Hospital Heliópolis of the State Health Department of the State of São Paulo in the period between 2011 and 2017. Data on staging of the tumor, socio-demographic characteristics of patients, eating habits and lifestyle were collected through medical records and questionnaires applied to patients. Spearman\'s correlation test and chi-square test were performed to test possible associations. Results: There was a positive correlation between SLPI in saliva and malnutrition SLPI (p = 0.03). The quantification of SLPI in serum by quartiles was associated with statistical significance for schooling (higher proportion of people with complete secondary education in the lowest quartile of SLPI), frequency of toothbrushing (a higher proportion of people brushing their teeth more than once per day in quartile with higher SLPI) and pathological staging (2nd quartile with a higher proportion of stages 3 and 4). In the evaluation of SLPI in saliva and mouthwash, there was an association with red meat consumption, with individuals with lower consumption only in the higher quartiles of SLPI. Conclusion: This study agrees with the hypothesis that SLPI in patients with oral cancer is related to lifestyle and staging of the lesion

Proteínas Totales, Fosfatasa Alcalina, Prostaglandinas E2 y Lisozima como Biomarcadores Salivales en Pacientes Adultos con Periodontitis Crónica / Total Protein, Alkaline Phosphatase, Prostaglandin E2 and Lysozyme as Salivary Biomarkers in Patients with Chronic Periodontitis

RESUMEN: La periodontitis crónica es una inflamación de los tejidos que rodean y dan soporte a los dientes. Diversos biomarcadores químicos y pro inflamatorios están aumentados durante el transcurso de la enfermedad. El objetivo del estudio fue determinar los distintos niveles salivales de proteínas totales, fosfatasa alcalina, prostaglandina E2 (PGE2) y lisozima en pacientes con periodontitis crónica. Se obtuvieron muestras de saliva de 31 pacientes con periodontitis crónica y se realizó un estudio de serie de casos para la determinación cuantitativa de los biomarcadores. La concentración de proteínas totales se encontró por sobre los rangos de referencia en 22 pacientes, la actividad de la fosfatasa alcalina se vio aumentada en 9 pacientes y la concentración de PGE2 se vio por sobre los rangos de referencia en 30 pacientes. Las proteínas totales y PGE2 son biomarcadores salivales en estos pacientes con periodontitis, no así la fosfatasa alcalina y la lisozima.

ABSTRACT: Chronic periodontitis is an inflammation of tissue that surrounds and supports the teeth; during the course of the disease there is an increase of different chemical and pro-inflammatory biomarkers. The objective of the study was to determine different levels in saliva of total protein, alkaline phosphatase, lysozyme and prostaglandin E2 (PGE2) in patients with chronic periodontitis. We used saliva samples from 31 patients who had chronic periodontitis and the study was a case of series. Our results showed 22 patients with increased concentrations of protein concentration, nine patients with increased alkaline phosphatase and PGE2 concentration was above the reference range in 30 patients: The total protein and PGE2 are good salivary biomarkers in patients with periodontitis, but not the alkaline phosphatase and lysozyme.

La saliva en pacientes edéntulos completos / Saliva in totally edentulous patients

La saliva es un fluido biológico importante en la fisiología de la cavidad bucal. El propósito de estarevisión fue considerar las relaciones entre el edentulismo completo y el perfil fisiológico de la saliva. El flujo salival, el pH y la capacidad tampón tienen relación con el número de dientes perdidos, presencia de prótesis dentales y métodos de determinación del flujo (saliva no estimulada o estimulada). Las fracciones de proteínas en muestras de saliva total muestran diferencias entre individuos dentados y pacientes edéntulos. Este conocimiento permitirá a los clínicos, comprender mejor el impacto del edentulismo sobre las propiedades de la saliva y planificar el tratamiento en consecuencia.

Saliva is an important biological fluid in oralphysiology. The purpose of this review wasto consider relationships among complete edentulism and saliva physiological profile. Salivaryflow rate, pH and buffer capacity has a relationwith the number of missing teeth, presence ofdental prostheses and methods of determining flow rate (unstimulated or stimulated saliva). Protein fractions in whole salivary samplesshow differences between dentate individuals and edentulous patients. This knowledge willenable clinicians to better understand the impactof edentulism on salivary properties and plan treatment accordingly.